Născut la Roma în 1961, Alfredo Bernardini s-a mutat în Olanda în 1981 pentru a se specializa în oboi baroc și muzică veche cu, printre alții, Bruce Haynes și Ku Ebbinge. În 1987 a primit diploma de solist de la Conservatorul Regal din Haga. 

A concertat în toată Europa, în Rusia, SUA, Canada, Japonia, China, Coreea, Malaezia, Egipt, Israel, America de Sud și Australia ca membru al unor prestigioase ansambluri baroce precum Hesperion XX, Le Concert des Nations, La Petite Bande, The Amsterdam Baroque Orchestra, Das Freiburger Barockorchester, The English Concert, Bach Collegium Japan, Balthasar Neumann Ensemble și altele. A cântat în peste 100 de înregistrări. 

În 1989 a fondat ansamblul ZEFIRO împreună cu frații Paolo și Alberto Grazzi. Înregistrările sale cu Zefiro au câștigat premii importante, cum ar fi Cannes Classical Award și Diapason d’Or de l’Année 2009. În calitate de director, a colaborat cu orchestre din Italia, Franța, Germania, Spania, Portugalia, Belgia, Olanda, Irlanda, Danemarca, Norvegia, Polonia, Marea Britanie, Suedia, Canada, Cuba, Australia, Israel și cu Orchestra Barocă a Uniunii Europene. În ianuarie 2013 a fost consilier și director al primului proiect de orchestră barocă al „El Sistema de Musica” din Venezuela. 

Cercetările sale privind istoria instrumentelor muzicale de suflat din lemn au avut ca rezultat mai multe articole publicate de importante reviste internaționale. Din 1992 predă oboi baroc la Conservatorul din Amsterdam, iar din 2014 este profesor la Universitatea Mozarteum din Salzburg. De asemenea, a predat între 2002 și 2009 la Escola Superior de Musica de Cataluña din Barcelona. Ha fost, de asemenea, profesor invitat în academii de muzică și cursuri de vară în Italia, Franța, Spania, Portugalia, Germania, Austria, Danemarca, Israel și SUA.